1905年，20岁的马叙伦的老照片，他思想进步、才华横溢。这一年，他随汤尔和东渡日本，在东京拜访了革命家章太炎，经章太炎介绍加入了同盟会，确立了革命立场，正式投身反清革命事业。此后，他在杭州、江山、诸暨等地担任教员，传播革命思想，并在1906年应陈介石老师之邀前往广州两广师范馆和方言学堂教书，与许多同盟会会员学生建立了深厚师生情谊。